bonjour tous le monde,
j'ai une manip "estimation de l'activité enzymatique"; j'ai vu sur un article qu'il faut broyer 1g de feuille avec 5ml du tampon phosphate 50mM (pH7). après une fois qu'on aura preparé l'extrait enzy, l'estimation de l'enzyme SOD se fait selon la reaction suivante:
3mL de mix de reaction: 40 mM tampon phosphate pH 7,8
13 mM Methionine
75uM nitroblue tetrazolium
0,1 mL extrait enzy
0,1 uM EDTA
2 uM Ribovlavin
les questions sont les suivantes: comment préparer les tampons phosphate sachant qu'ils n'ont pas préciser quel produit utilisé (Na2hPO4 ou KH2PO4...) est ce que je pourrait le préparer avec n'importe quel produit? je prépare chaque solution a part avec son pH??
- comment avoir les volumes à utiliser pour chaq sub pour la réaction?? est ce que je devrais préparer des solutions mère avec des concentrations que je définie et après je calcul le Volume de prise de cette solution pour avoir la concentration demandé dans le volume de 3ml de reaction??
merciii pour vos reponses
là je suis perdue o-O
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