Bonsoir,
est ce que quelqun peut me dire ce que ça veut dire une protéine stable ou une cellule stable ou plutôt tel proteine se stabilise???
Exemple : P53 se stabilise
la lignée cellulaire COS-1 est stable parce que......
Merci pour votre aide
Bonsoir,
les protéines peuvent adopter plusieurs états conformationnels, avec des états plus stables que d'autres, et il est communément admis que la formation de complexes protéiques (protéines interagissant entre elles) peut stabiliser (ou déstabiliser) la protéine dans un état conformationnel donné. Si l'état stable est l'état actif, la stabilisation provoque la fonction. C'est un peu simpliste, mais j'espère t'avoir aidé.
Pour les lignées cellulaire, je comprends un lignée stable comme une lignée exprimant stablement une protéine d'intérêt. Il faut mettre en opposition les lignées stables au lignées transitoires. Je m'explique, dans le cas d'expression hétérologue d'une protéine dans une cellule eucaryote on peut soit
i) transfecter avec un plasmide qui contient le gène d'intérêt, puis effectuer sa manip sur les cellules (dans ce cas, toutes les cellules n'exprimeront pas la protéine, et celles qui le font, élimineront en quelques génération le plasmide)
ii) transfecter stablement avec un plasmide qui contient le gène d'intérêt et un gène de résistance, on ajoute un agent de sélection, donc seuls les cellules qui possèdent le plasmide survivent, et au final, il y aurait intégration du plasmide dans le génome... donc ces cellules exprimeront pendant de très nombreuses génération la protéine.
Gunkan
Merci beaucoup Gunkan
c'est trop compmliqué
peut tu m'expliquer ça stp: en fait c un extrait d'article
The additional phosphorylations described by Tack and Wright (20) that were not detected in the current study might be related to the use by the authors of CV-1 cells, the parent cell line of the COS-1 cells used in our present study. They infected the CV-1 cells with SV40 wild-type virus. However, the COS-1 cell line is stable because it contains only a defective mutant of SV40 that codes only for wild-type T antigen
MERCI d'avance
euh... déjà la prochaine fois que tu cites un article, il serait préférable que tu donnes la référence... parce qu'un bout de phrase, c'est pas très scientifique...
Je vais te dire ce que je pense (ce qui n'est pas forcément la pensée de l'auteur!!!) les lignées cellulaires sont des lignées immortalisées (généralement par des virus comme le SV40, mais cette immortalisation n'est pas sans conséquence sur la cellule avec des changements de profil d'expression de gènes et beaucoup d'autres choses) dans l'article cité en ref 20 les auteurs ont utilisé un virus WT, alors que pour les COS-1 c'est un virus muté, le "contexte" de tes cellules n'est pas exactement le même ce qui pourrait entrainer ces différences de phosphorylations...
Voilà mon avis.
Gunkan
Merci Gunkan
l'article sur lequel je travaille c'est : Identification of New p53 Acetylation Sites in COS-1 Cells
A. Joubel, RJ. Chalkley, KF. Medzihradszky, H. Hondermarck, AL. Burlingame. 2009*; Mol. Cell. Proteomics 8:1167-1173
ça peut etre te paraitre stupide comme question mais ça veut dire quoi lignées immortalisées??
ce que je comprends pas aussi et g beau cherché g rien trouvé c'est :
la différence entre SV40 sauvage et SV40 mutant défectueux se situe où???
et bien, une lignée immortalisée c'est une lignée qui ne rentre pas en phase Go ou sénescence, elle se multiplie sans arrêt, de façon anarchique, un peu comme une tumeur cancéreuse... c'est pour ça qu'on les utilise dans les labo... c'est facile.
Ce n'est pas stupide c'est juste que tu sembles ne pas avoir ces connaissances...
Pour les SV40, je ne suis pas spécialiste, (et j'ai peur d'avoir déjà fait du hors sujet...) je pense que tu devrais regarder comment il rend immortel les cellules de mammifère...
Gunkan
ok merci encore une fois
