Bonjour,
Je me lance dans le clonage d'un gène, que je vais amplifier a partir d'ADN génomique de levure (le gène ne contient pas d'intron).
Afin de pouvoir le cloner dans mon vecteur d'expression, je dois ajouter un site de restriction en 5' et en 3'.
Il me semble qu'il est préférable d'ajouter quelques bases avant (dans le cas du 5') et après (pour le 3') les sites de restriction afin que l'enzyme puisse cliver les extrémités de l'amplicon.
Savez-vous combien de bases sont conseillées, et y'a-t-il une séquence type?
Merci d'avance,
Bien cordialement,
Enialix
-----