plasmide pcDNA3 et mock??

[invite84b04748]

Bonsoir à tous

est ce quelqu'un sait ce que c'est que le plasmide pcDNA3 et le plasmide mock et pourquoi on les utilise?

merci
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[TanguyE]

Bonjour,

Le plasmide pcDNA3 est ce qu'on appelle un plasmide vide, c'est à dire qu'il contient tout les éléments d'un plasmide classique (promoteurs, gène de résistance, origine de réplication...) mais pas de gène d'intérêt. Il est utilisé comme témoin négatif lors de transfections (transfection de matériel génétique mais pas d'expression de gène) ou comme témoin positif lors de transformations bactériennes (formation de colonies grâce au gène de résistance).

Pour ce qui est du mock, je pense que vous faites erreur, ce n'est pas un plasmide mais cela correspond à un témoin négatif, c'est à dire qu'on ne tranfecte/transforme rien, le plasmide est remplacé par de l'eau dans le milieu de transfection/transformation. Cela sert à voir si il n'y a aucun élément pouvant fausser les résultats dans le milieu de transfection/tranformation ou dans les cellules/bactéries.

En espérant avoir répondu à vos questions.

[invite84b04748]

ok je vois merci beaucoup TanguyE! voici le lien de l'article http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3382156/
sur la figure 9A c'est quoi aors la différence entre "mock" et control"?? Si tout deux servent comme témoin négatif c'est quoi la différence ou qu'est ce que l'un apporte de plus que l'autre?

Merci

[TanguyE]

OK, donc on est dans le cas d'une transfection.

Du coup, je suppose que le "control", c'est uniquement des cellules non transfectées qui ont été analysées sans aucune modification et que le "mock" représente des cellules auxquelles on a ajouté simplement du milieu de transfection qui ne contient pas d'ADN. Cela permet de montrer que le milieu de transfection n'influe pas sur les résultats.

En fait dans ce cas, les controles de la manip sont les suivants: rien, milieu de transfection, milieu de transfection et plasmide vide. Ils permettent de voir si l'ajout de chacun des composant a un effet sur les cellules.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite84b04748]

mmmm ok je vois plus clair maintenant merci beaucoup
en fait le milieu de transfection il contient quoi? (j'ai jamais fais de manip de transfection)

[TanguyE]

Le milieu de transfection contient en général: le plasmide à transfecter (ou de l'eau dans le cas du mock), l'agent de transfection (qui est en général un produit permettant de former des liposomes contenant les plasmides) et du milieu de culture (selon les méthodes).

Un peu plus sur la transfection par ici

[invite84b04748]

ok merci beaucoup

[invite1f50a10e]

j ai une question en fait dans une résultats si on voit une bande pour le MOCK ça vaut dire quoi? parc que normalement on doit pas avoir aucune bande pour ça n est pas ?