[sels] dans un tampon

[invite96ea98dc]

Bonjour tout le monde, je possede dans une manip un tampon de lavage pour une chromato d'affinité sur du cobalt, et je saisis pas la forte concentration en sels (1000mM)
Si vous connaissez son utilité je suis preneur, merci beaucoup !!!
-----

[invite853321bf]

Bonjour,
alors je pose 4 et je retiens 3... oui, c'est ça 1000 mM = 1M, comme on est fainéant dans les labos, ça m'étonne qu'on se soit amusé à compliquer l'écriture
Maintenant, non je ne peux pas dire à quoi servent les sels, car je ne sais pas de quels sels il s'agit.

[invite96ea98dc]

Oups, ben en fait c'est du NaCl tout simplement, j'ai cru comprendre que ca servait a limiter les fixations non spécifiques sur la colonne, mais j'en suis pas sur, et je voudrai pas dire de bétises sur mon rapport de stage merci pour cette réponse, je commençait a penser que personne répondrait :'(

[invite96ea98dc]

J'en profite pour poser une autre question =) dans un tampon de gel filtration, je dis mettre du TCEP, et je n'ai aucune info quand a son utilité...

Merci
Waaxx

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite4ff72fd5]

Bonjour tout le monde, je possede dans une manip un tampon de lavage pour une chromato d'affinité sur du cobalt, et je saisis pas la forte concentration en sels (1000mM)
Si vous connaissez son utilité je suis preneur, merci beaucoup !!!

En chromato d'affinite au metal comme cobalt ou nickel avec TAG histidine, le sel n'influe pas sur la fixation TAG <-> resine, en revanche cela permet de limiter les fixations non specifiques de tes proteines (dues au charges).

J'en profite pour poser une autre question =) dans un tampon de gel filtration, je dis mettre du TCEP, et je n'ai aucune info quand a son utilité...

Merci
Waaxx

Le TCEP est un agent reducteur tout comme le DTT, suivant le pH de tes tampons l'un est preferable a l'autre. Mais les deux sont la pour eviter l'oxidation de tes proteines (notamment des cysteines)

Ici tu trouvera un comparaison :
http://info.agscientific.com/blog/bi...ucing-Reagents