Bonjour,
Est-ce que quelqu'un peut m'aider s'il vous plait à designer des primers pour le clonage d'une protéine à laquelle je dois ajouter un tag mcitrine.
Je dois réaliser un clonage "overlap" et je suis complètement perdu... En gros, je dois insérer le tag mcitrine entre le peptide signal et le reste de la séquence de ma protéine.
Tout d'abord est-ce que je dois designer mes primers en utilisant la séquence d'ADNg du gène codant pour ma protéine ou bien est-ce que je dois utiliser la cds ou la séquence d'ADNc?
Comment est-ce que je peux identifier la séquence d'ADN correspondant au peptide signal de ma protéine (je connais le peptide signal mais je ne sais pas comment identifier quelle partie de la séquence d'ADN correspond à ce peptide signal). Est-ce que je dois faire un blastx?
je vous remercie d'avance!
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