Bonjour

Je viens vers vous pour des conseils sur une mise au point qui me pose problème.

Je fais une Elisa Sandwich, en utilisant:

100 ng/100 µl d’Ac de capture/PBS (souris)
Blocage avec du lait 5%
Puis mettre mon Ag (gamme de dilution)
Puis mon AC primaire (humain) et à la fin je mets mon Ac secondaire (anti humain)

Au début j’avais un bruit de fond assez important de l’ordre de 0.8 (DO) mais il est quand même stable pour tous les contrôles négatifs, par contre les résultats des puits Ag, sont assez hétérogène, et je n’arrive pas à avoir une gamme, pourtant je veille à bien faire ma gamme d’Ag !

Quelqu’un peut m’orienter, parce que je suis complétement désespérée, ça fait 2 mois que je suis dessus