Bonjour,
J'ai une petite question d'ordre technique. Je procède en ce moment à des extractions d'ARN. Pour cela, je dois d'abord gratter mes cellules au fond de flasques, les récupérer et les faire culotter avant de les stocker à -30°C. J'ai l'habitude de gratter des cellules en les gardant sur glace après les avoir lavées deux fois au PBS. N'ayant pas de glace sous la main, j'ai fait sans! Est-ce grave ? Vaut-il mieux recommencer ?
Merci pour vos réponses
pas forcément grave. Mais c''est quand meme pas pratique de ne pas avoir de glace sous la main.... Pour la qualité de vos ARN, ben ça dépendra un peu de vos cellules quand même. Et tu temps pris à les gratter...
Disons que la glace ralenti le metablisme,
En les grattant tu induis un stress fort, tu as de fortes probabilité d'avoir déclenché des mécanismes, tu as décompartimenté ce qui peut avoir laissé agir des enzymes là ou elles n'auraient pas dues... et tout ces trucs viennent modifier l'état de la cellule, tu n'es plus dans les conditions initiales,
Donc tout depend de ce que tu veux faire avec tes ARN, ca peut avoir un impact important comme ca peut être négligeable selon ce que tu cherches a faire
