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Réalisation PCR



  1. #1
    louloute377

    Réalisation PCR

    Bonjour,

    Pouvez-vous me détailler les différentes étapes et procédures pour la réalisation d'une Pcr. Novice en travail de laboratoire, je dois réaliser le génotype des lignées de souris et j'aimerais connaitre les différentes étapes auparavant.
    Merci à vous.

    -----


  2. #2
    Tibosax

    Re : Réalisation PCR

    Tu travailles dans un laboratoire et il n'y a personne pour t'apprendre comment faire une PCR ?

    Les différentes étapes c'est : extraction d'ADN génomique puis PCR.

    J'ai un protocole maison pour faire de l'extraction d'ADN à partir de morceaux de queues de souris. Mais si tu as un kit d'extraction d'ADN génomique avec colonnes c'est aussi bien.

    Solution A:
    25 mM NaOH
    0.2 mM EDTA

    Solution B:
    40 mM Tris HCl pH 5

    Put tail into 100 ul solution A
    Vortex at 95 degrees for 30 minutes
    Add 100 ul solution B
    Vortex
    Spin down briefly
    Take 1 ul for a 25 ul PCR reaction

    Pour ce qui est du protocole de PCR, ça dépend de l'enzyme que tu utilises. Et c'est de toute façon marqué sur la notice.


    Question idiote peut-être, mais comment on peut se retrouver à travailler dans un labo de biologie sans savoir faire de PCR ? :/

  3. #3
    louloute377

    Re : Réalisation PCR

    Merci pour votre réponse. Je ne suis pas du tout dans ce service en faite je suis animalier à la base et on me demande de réaliser des pcr en complément de mon activité, voilà le pourquoi de ma question

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