Problème tâche gel agarose

[invitebc7cfaed]

Bonjour,

Je suis actuellement en pleine optimisation de PCR et d'électrophorèse. Mais après ma dernière manip. un nouveau souci est apparu au moment de la révélation de mon gel : une grosse tâche. Il s'agit d'un gel d'agarose à 2%, j'utilise du TAE à 1%, avec un voltage à 135V pendant 45 min. On utilise du GelRed comme intercalant, que l'on utilise sous forme de bain, à l'obscurité pendant 15 min sans rinçage. Ensuite, la révélation se fait à l'aide du GelDoc de B....D.



A votre avis, d'où vient cette tâche et comment l'éviter ?

Merci
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[Flyingbike]

gel pas homogène ? vitre sale ? elle es bien sur le gel et pas sur le support ou la vitre ?

[invitebc7cfaed]

C'est dans/sur le gel car j'ai déplacé le gel sur la vitre et la tâche "se déplace" avec le gel. C'est comme si quelque chose avait diffusé dans le gel. J'ai préparé le bain de GelRed la veille et mon premier gel n'avait pas ce problème. Je ne comprends pas d'où ça peut venir.

Est-ce que si quelqu'un a utilisé le même bain de GelRed que moi, pour un gel fait avec du TBE, ça peut donner ça ?

[Flyingbike]

je ne pense pas. le bain était récent ?

De toute façon votre gel est largement assez clair pour que ça ne soit pas dramatique.

Pourquoi ne pas utiliser le gelRed directement dans le gel ?

[A voir en vidéo sur Futura]