Volume réaction de digestion

[invite96929ba3]

Bonjour, je n'ai pas compris comment déterminer le volume minimum d'une réaction de digestion en fonction du volume d'enzyme de restriction.

Quelqu'un peut il me l'expliquer ?

Merci d'avance
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[Flyingbike]

Vous avez un exemple ?

Pour une réaction de digestion, ce qui compte, c’est le rapport enzyme/quantité d’ADN

[vinssss]

Bonjour,

les enzymes sont dans un tampon pouvant contenir du glycérol. On dit qu'il ne faut pas dépasser 1/10e du volume de la réaction avec la volume d'enzyme. Par exemple, 2ul de tampon 10x, 1ul d'ADN, max 2ul d'enzyme, H2O qsp 20ul... Ensuite, les enzymes peuvent être à différentes concentrations (1unité/ul, 20u/ul, ...) ou la définition d'une unité est la quantité d'enzyme nécessaire pour digérer 50% d'1ug d'ADN en 1h...

Vincent