Bonjour,
J'ai un petit problème :
Le réactif de bradford en présence de protéine donne un complexe de couleur bleu. Mesurable au spectrophotomètre
On effectue une courbe d'étalonnage avec plusieurs concentration connue en BSA (Standard : Albumen de serum bovin).
J'ai donc ma courbe avec les concentrations en µg/ml et l'aborsbance.
Seulement, mon inconnue, est une beta-lactamase! Protéine qui n'a aucune raison de ressembler à l'albumen de serum bovin...
Alors que faire pour déterminer sa concentration?
Je place l'absorbance de ma beta lactamase sur ma courbe d'étalonage en µg/ml de BSA? et j'en déduis sa concentration en µg/ml?
Ou bien je transforme ma droite d'étalonnage en mol/L et j'estime ma concentration en beta lactamase en mole/L?
Merci de votre aide car cette facon de proceder ne me semble pas très rigoureuse quoi qu'en dise le manuel de tp...
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