Bonjour,
je souhaite faire des dosages plasmatiques de H2S.
La méthode utilisée est celle du bleu de méthylène(comme pour la question de raf la menace).
Voici le protocole: Ajout d' Acétate de Zn (0,5%) + Plasma, Ajout de DMPPDA (dans du H2SO4 à 4M) puis de FeCl3(dans H2SO4 à 0,015M). Et enfin ajout de TCA 10% suivi d'une centrifugation pour enlever les protéines. Lecture au spectro à 670nm.
Mon premier problème est de savoir si les protéines contenant du souffre vont réagir (et si cela va rester après la centrifugation) et si il y a d'autres molécules qui vont réagir tels que HS-, les sulfites, etc...
De même j'ai un problème car dans certains cas la solution devient rouge(ce qui me donne des valeurs négatives par rapport au blanc), pourquoi et comment y remédier(est-ce le DMPPDA qui s'oxyde?,...).
Je sais que j'en demande beaucoup...
Merci d'avance pour une/des réponse(s).
-----
