chromato par echange d'ion
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chromato par echange d'ion



  1. #1
    invite3d0b6ec5

    chromato par echange d'ion


    ------

    J'ai une petite (voire tres petite question..)
    cette technique sert a trier des proteines (ou des molecules bon on s'en fout un peu) suivant leur charge global. La phase fixe est composée de bille fonctionnalisées, elles ont soit chargé positivement ,soit negativement. Prenons le cas ou elle le serait negativement.

    on injecte dans la clonne (de chromato) des proteines. Les premieres je presume que ce seront les proteines ayant une charge nulle..

    Mais pour la seconde fraction.. ce seront lesquelles ? Les proteines ayant une CG negative resteront collées , et celle ayant une CG positve seront repoussé vers le haut...

    C'est là que je vous soumets cette question.. dans le cas ou la premiere fraction serait des protéines ayant atteint leur point isoelectrique, quelles seront les proteines de la deuxieme fraction ?

    -----

  2. #2
    Zellus

    Re : chromato par echange d'ion

    Salut,

    Lorsque tu veux purifier des protéines, tu le fais à partir d'un lysat cellulaire, dont le volume est souvent très supérieur à celui de la colonne. Les protéines qui ne se fixent pas passent toutes en même temps à travers la colonne, qu'elles soient de charge neutre ou opposée à celle de la colonne. Elles sont simplement emportées par le flux de liquide, et les protéines de charges opposées ne sont pas repoussées vers le haut.
    Après tu élues avec un gradient de sels et les protéines les mieux fixées sortent en dernier.

    Citation Envoyé par raskalnikov
    Les proteines ayant une CG negative resteront collées
    Avec une charge positive plutôt tu voulais dire avec ton exemple non ?

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