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Pic fantôme en HPLC



  1. #1
    papangue

    Pic fantôme en HPLC


    ------

    Je suis actuellement stagiaire dans un centre de recherche et d'esais sur la canne à sucre. L'HPLC est une technique utilisée au labo pour identifier et doser les sucres dans des mélasses, des jus sucrés et tous les produits dérivant du process sucrier. Depuis longtemps le labo a un problème avec l'analyse des sucres puisqu'apparaît souvent un pic fantôme entre le saccharose et le glucose. La seule manière d'éliminer ce pic afin d'avoir un dosage exact du glucose est de travailler sur une colonne régénérée.Cependant, la régénération de la colonne est une perte de temps.
    Pour revenir à ce pic mystère, on ne sait pas s'il correspond effectivement à un composé ou à un quelconque artefact. En effet, il n'est pas toujours présents (cf régénération de la colonne) mais il a tendance à "aller" vers le pic du glucose jusqu'à s'incruster dans le glucose après plusieurs injections d'échantillons.
    Auriez-vous une idée pour solutionner ce problème de pic fantôme?

    -----

  2. #2
    stef

    Re : Pic fantôme en HPLC

    t'as pas une technique qui pourrait te permettre d'identifier le composer comme une LC-MS par exemple?

    Et le pic il est d'apparence normale, bien symetrique ou alors il a tendance à trainer?
    Tout travail merite salaire, j'attends toujours!

  3. #3
    Gotferdom

    Re : Pic fantôme en HPLC

    oui LC-MS ou HPLC préparative + MS ou RMN ... .

    ça doit être un composé qui est trés retenu par la colonne et qui migre aprés plusieurs injections, et que tu élimines en régénérant la colonne.
    Peut-être qu'un pré-traitement serait nécessaire si tu veux supprimer ce pic (chromato sur silice ou alumine à voir) ... .
    Mais pourquoi le supprimer s'il fait partie de ton mélange ? Le dosage du glucose sans ce produit doit être faux ?

  4. #4
    moco

    Re : Pic fantôme en HPLC

    Et si ton pic fantôme était l'un des isomères alpha- ou béta- du glucose. Le béta est stable en solution. L'alpha est stable a léétat solide. Mais dans ta phase mobile, et/ou dans ta phase stationnaire, l'équilibre est peut-être déplacé.

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    marseillfrance

    Question Re : Pic fantôme en HPLC

    bonjour tout le monde

    en effet, je travaille sur le dosage de la betamethasone goutte par HPLC

    étalon: dissoudre 50mg de betamethasone avec une solution à 1pour mille acide acetique glacial dans methanol et completer au volume de 50ml
    diluer 5ml de cette solution avec le meme solvant au volume de 50ml

    phase mobile: 70% eau - 30% acétonitrile

    j'ai rien obtenu comme resultat et je n'arrive pas a interpreter

    c'est quoi le probleme ??

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