Hplc
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Hplc



  1. #1
    invite11d94b90

    Hplc


    ------

    Bonjour je dois effectuer un projet en chimie analytique il faut doser le paracatémol et la caféine dans l'actron et il faut optimiser cette séparation. Pour cela, je vai dan un premier temps réaliser un spectre UV du paracétamol et de la caféine cependant je ne sais pas comment faire si il faut que je realise une solution contenant quelle quantité de paracétamol ke doi introduire.
    Ensuite je compte vérifier la linéarité mais je ne sais pas a partir de quelle quantité je dois réaliser ma série de solutions étalon.
    Merci de m'aider

    -----

  2. #2
    invitea69ab818

    Re : Hplc

    Bonjour,

    Pourquoi ne pas commencer par une dose relativement élevé de composé et diluer au fur et à mesure pour respecter la loi de Beer-Lambert en ayant une absorbance comprise entre 0 et 1 qui normalement respecte la linéarité.
    Ensuite pour la séparation par HPLC tu as des colonnes phase inverse pour faire ça. Un petit protocole de séparation:
    colonne 250x4mm NUCLEODUR C18 pyramid,5µm
    eluant A:50 mM NH4H2PO4, ph 2,5
    B:Acétonitrile
    Gradient: 0-60% B en 13 min
    Débit:1ml/min
    Température25°C
    Detection: UV 261nm
    Tes composé sortent autour de 7min pour le paracétamol et 8min pour la cafféïne

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