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HPLC -->variation de parametre -->effet sur chromatogramme



  1. #1
    theruddy55

    HPLC -->variation de parametre -->effet sur chromatogramme


    ------

    re salut, je me demandais aussi, (je sais suis chiant mais exam tp chimie demain ) , comment varie les pics d'un chromatogramme, si l'on joue sur les parametres suivants :

    HPlc phase mobile: polaire / phase stationnaire : apolaire

    -Modification du debit de la phase mobile
    -Modification de la longueur d'onde
    ( et aussi que ce passe t'il si on depasse la LAmbda max de l'echantillon (longuer d'onde max).
    -variation de concentration des solvant dans la phase moobile

    Et si il y en a , quels autres parametres peuvent altérer les pics obtenu??

    -----

  2. #2
    Fajan

    Re : HPLC -->variation de parametre -->effet sur chromatogramme

    si le débit est trop rapide, tes pics vont s'applatirent

    Si tu change ta longueur d'onde, tu perds un peu en précision, sensibilité (l'absorbance varie moins en fonction de la concentration)

    Si tu varies la composition des solvants, les temps de rétensions vont changer

  3. #3
    theruddy55

    Re : HPLC -->variation de parametre -->effet sur chromatogramme

    pour le debit d'accord , si on augment les pics sortiront plus vites....

    pour la longueur d'onde au fait c'est :

    composé A : Lamda max = 260 nm
    Composé B : Lamda max = 300 nm

    De ces deux composé lequel sortira en premier si on travail a 275 nm
    240nm


    et pour les solvant, comment vontt changer les temps de retentions
    ?

  4. #4
    Fajan

    Re : HPLC -->variation de parametre -->effet sur chromatogramme

    Mais je connais pas tes spectres moi...

    je n'en sais rien... mais le fait de changer de longueur d'onde ne change en rien l'élution de ta colonne...

    Un spectro UV visible ne sert qu'à détecter quand un produit sort.

    Les solvants ca depend de plein de trucs, de ta phase ordinnaire ou en phase inverse et surtout de la nature de A et de B

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