Bonjour,
Pourriez-vous m'expliquer la différence entre une une analyse par HPLC et CCM.
Les 2 méthodes permettent d'analyser les espèces chimiques présentes dans une solution, mais je les vois souvent utilisées en parallèle afin d'effectuer des tests différents.
Merci à vous.
Salut,
as-tu cherché sur google ou wikipedia au préalable ?
ces 2 méthodes sont complètement différentes, même si bien sûr elles reposent sur le même principe de la chromatographie :
séparer différents composés d'un mélange en fonction de leurs affinités différences avec une phase mobile dans laquelle ils sont transportés (l'éluant) et avec une phase stationnaire au contact de laquelle ils passent (couche mince ou support interne à la colonne).
La CCM c'est pour un mélange liquide à séparer. Tu déposes une goutte de ton mélange avec un capillaire sur une couche mince (plaque métallique avec un revêtement de silice => composé polaire). Losque l'on place la plaque de manière à ce que le bas trempe uniformément dans un bain d'éluant, celui-ci va remonter par capillarité. Plus les composés du mélange vont être polaires, plus ils vont aimer les autres composés polaires, et plus ils vont avoir d'affinité pour la silice plutôt que pour l'éluant. Donc ils vont se retrouver en bas du front d'éluant (ligne de migration de l'éluant à la fin de la CCM). Pour les composés les plus apolaires du mélange, c'est le contraire, on va les retrouver en haut, car ils vont 'suivre' l'éluant, pour lequel ils auront beaucoup d'affinité, au maximum !
Une HPLC fonctionne de manière plus automatisée. Elle fonctionne également pour un mélange liquide qui sera entraîné par un éluant liquide. La principale différence réside dans la nature de la phase stationnaire (colonne remplie d'un support qui peut varier d'une colonne à l'autre : grains, gels, matrice solide. au lieu d'une plaque de silice pour la CCM). Une deuxième différence importante réside dans le fonctionnement automatique du procédé : une pompe 'pousse' l'éluant à circuler à une certaine vitesse au contact de la colonne stationnaire, alors que pour la CCM, c'est l'éluant qui migre par capillarité le long de la plaque de silice (vitesse non réglable, mais dépendant directement de la volatilité de l'éluant, et de son affinité pour la plaque stationnaire).
J'espère que ceci t'aura un peu aidé
Je complèterai la réponsede citron_21 en disant que la HPLC est bien plus précise, et donc qu'elle permet d'obtenir des résultats quantitatif et non plus uniquement qualitatif.
Aujourd'hui il existe de scanners pour avoir de la CCM quantitative mais c'est assez chers quasiment le prix d'une HPLC.
En gros tu peux retenir qu'on peut faire des dosage en HPLC, pas en CCM.
on peut faire de la CCM quantitative sans scanner
il faut commencer par faire des gammes
bien sûr, on n'aura pas la précision et la sensibilité de l'HPLC
cordialement
En fait, je connais le principe de l'HPLC et de la CCM, c'est plutôt dans les applications que j'ai pu rencontrer que je m'interroge:
Utilisation de l'HPLC pour analyser les molécules présentes dans une solution, et utilisation de la CCM pour analyser la pureté d'un produit.
Une HPLC serait donc plus une méthode d'analyser qualitative et la CCM plus une méthode d'analyse quantitative ?
ca serait plutôt l'inverse car en HPLC tu as un chrommatogramme qui est tracé et quasiment tous les logiciels te permettent d'avoir l'aire d'un signal alors qu'en CCM tu as une tâche avec une certaine intensité que tu compares par exemple à une gamme. >Souvent la CCM est utilisé avnat l'HPLC pour avoit une idée de comment un soluté migrerait dans une colonne avec tel ou tel éluant...
