chromato echangeuse d'ions
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chromato echangeuse d'ions



  1. #1
    invited7ebb5dc

    Unhappy chromato echangeuse d'ions


    ------

    Bonjour,
    j'ai fais un TP au cours duquel on a séparé deux acides aminés (alanine et arginine) sur résine échangeuse de cation. pour cela on a acidifié la résine avec du HCl 1M. On a ensuite déposé le mélange d'acide aminé sur la résine et on a élué avec HCl 1M puis avec HCl 4M. L'alanine est le premier à être élué et l'arginine le second mais je n'arrive pas à expliquer pourquoi car mes deux acides aminés sont tous deux sous leur forme positive (NH3+). Est ce que le fait que l'arginine possède plusieurs fonction amine influe sur sa capacité à se fixer à la résine?
    Merci d'avance pour votre aide.

    -----

  2. #2
    inviteb7fede84

    Re : chromato echangeuse d'ions

    Bonjour.

    L'arginine possède un groupe guanidino extrêmement polaire, pour le "décoller" il faut y mettre le prix !

  3. #3
    invited7ebb5dc

    Re : chromato echangeuse d'ions

    Merci c bien ce que je pensé mais je n'en été pas sur.
    une autre question qui découle de la réponse: est ce que l'arginine est liée à la résine par toutes ses fonctions amines ou juste une seule?

  4. #4
    invited7ebb5dc

    Re : chromato echangeuse d'ions

    Donc si j’ai bien compris, lors de l’élution on a ph<<pi (point isoélectrique) donc le pi n’intervient pas dans cette séparation. Mes deux acides aminés étant tous deux polaires, je compare ce qui leur confère leur caractère polaire. Pour l’alanine on a juste une fonction amine qui en milieu acide s’ionise sous la forme NH3+. Pour l’arginine, on a un groupement guanidino en plus de la fonction amine. De ce fait, l’arginine étant beaucoup plus polaire que l’alanine, elle sera plus fortement retenue par la résine. On a donc élution par polarité croissante.

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    inviteb7fede84

    Re : chromato echangeuse d'ions

    Citation Envoyé par baguy Voir le message
    Merci c bien ce que je pensé mais je n'en été pas sur.
    une autre question qui découle de la réponse: est ce que l'arginine est liée à la résine par toutes ses fonctions amines ou juste une seule?
    On peut sans problème protoner les 2 fonctions amines.

  7. #6
    invited7ebb5dc

    Re : chromato echangeuse d'ions

    merci beaucoup pour votre aide c plus clair maintenant!!

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