Pic qui traine / dosage acrylamide par HPLC

[invite6e1be89f]

Bonjour,

Je viens de découvrir ce forum et je me permet de vous exposer mon problème.
Lors du dosage de l'acrylamide C3H5NO par HPLC, colonne C18, phase mobile eau acidifiée 0.1% acide formique, mon pic "se traine en retombant" sur un bon 2minutes.

J'ai effectué quelques essais:
Acidifié un peu plus mon milieu (1% d'acide formique) pour le même résultat.
Ajouté un peu de phase organique (1% de MeOH) pour le même résultat. (Si je met trop de MeOH (10%) mon pic se transforme en patate).
Changé de colonne (autre C18) pour le même résultat. Remplacé la colonne par une Phényl : le pic s'affine (montée plus raide) mais la descente reste toujours identique.

L'interprétation est donc loin d'etre optimale.....

Mes autres méthodes de dosage n'ont pas ce soucis donc je ne peux incriminer l'appareil (capillaires...)

Voilà ! Si vous avez des idées à me suggérer, je suis preneur !

Merci !
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[HarleyApril]

bonjour

en utilisant le moteur scirus.com tu trouveras plein de publications relatant des analyses HPLC de l'acrylamide (48 000 réponses dont 10 000 dans sciencedirect)

cordialement

[invitec69523a9]

Bonjour,

moi je travaille avec un UHPLC. J'améliore parfois cette situation en modifiant tout simplement le débit. J'ai commencé à faire ça après le conseil d'un représentant d'Agilent. Bonne chance!

[invite64bf81e0]

Bonjour,
La molécule acrylamide est probablement ionisée dans les conditions d'analyses utilisées. Cela contribue fortement à l'élargissement du pic.
pas d'adresse mail dans les message
pour la modération

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite6e1be89f]

Merci à vous pour les conseils.
Je vais voir ce que ca donne avec modification du débit (je n'y avais pas pensé...), même si je ne pourrais pas l'augmenter fortement car je suis couplé à une masse.

[HarleyApril]

bonjour

j'ai du mal à croire que de l'eau contenant 0,1% d'acide formique arrive à protoner notablement un amide

cordialement

[invite64bf81e0]

Bonjour,
0,1% d'acide formique est une forte concentration en HPLC. Les amides sont des bases faibles. Cela peut s'expliquer par le fait que le doublet de l'atome d'azote est délocalisé sur plusieurs atomes.

Vous trouverez confirmation dans les 48000 réponses du moteur scirus.com.
Cordialement

[HarleyApril]

The pKa value of an O-protonated amide is close to zero, whereas an
N-protonated amide has a pKa value of about ÿ7; see: A. J. Williams,
J. Am. Chem. Soc. 1976, 98, 5645 ± 5651.

avec un pKa voisin de zéro, ça m'étonne d'observer de la protonation en milieu aqueux !

cordialement