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spectrophotométrie




  1. #1
    moi332

    Exclamation spectrophotométrie

    bonjour,

    Je dois réaliser une gamme d’étalonnage de spectrophotométrie pour réaliser le dosage des phosphates jusqu'à 2 µmol de P par tubes à partir de dihydrogénophospate de potassium anhydre :

    Dans un tube à essais, introduire:
    - 5mL d'échantillon
    -5mL de réactif de coloration

    merci d’avance
    moi 332

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    ZuIIchI

    Re : spectrophotométrie

    OK ...

    C'est quoi la question ?

    Qu'est-ce que tu penses faire ? C'est quoi ton avis sur la question ?

    Tu es sûr que ton énoncé est complet ?

  4. #3
    moi332

    Re : spectrophotométrie

    salut ZuIIchI
    oui mon ennoncé est complet: il faut proposer un mode opératoire pour preparer un gamme d'étalonage jusqu'à 2µmol de P / tube

    à mon avis, il faut diluer le dihydrogénophospate de potassium anhydre pour obtenir une concentration de 2µmol/L

    le facteur de dilution serait alors de 2E-6/10E-3=0.0002
    puis on met 5mL d’échantillon dans le dernier tube
    4.5mL d’échantillon dans l'avant dernier
    etc
    mais ça me semble assez bizarre


  5. #4
    moi332

    Re : spectrophotométrie

    et un facteur de dilution de 0.0002 n'est pas trés pratique

  6. #5
    sfnsfn2

    Re : spectrophotométrie

    il faut préparer une solution par exemple à 0.001M et faire des dilution selon la gamme
    si le facteur de dilution est tres grand, passer par des solution intermédiaires
    qui se ressemble s'assemble (Homère)

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    moi332

    Re : spectrophotométrie

    Je t'avoues que je n'ai pas très bien compris ton raisonnement ni comment tu trouves 0.001M

  9. #7
    sfnsfn2

    Re : spectrophotométrie

    tu veux préparer une courbe d'étalonnage /
    ce que j'ai compris est lorsqu'on utilise 5ml échantillon + 5ml colorant la concentration du P est de 2umol/l

    dans les autres tubes, 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 ..... 4.5ml de l'échantillon
    si c'est ça

    la loi de dilution
    C1V1=C2V2
    pour la solution 1 (5ml échantillon)
    C1=C2V2/V1
    C1=2*10/5 = 4umol/l
    premièrement il faut préparer une solution à 4uM en P à partir du dihydrogénophospate de potassium anhydre KH2PO4, M=136.08g/mol, le phosphore présente 31/136.08=22.78% de cette masse

    si on veut préparer 100ml de cette solution il faut peser m=CMV/0.2278=238.95ug et c'est pas possible (il faut des balances très sensibles)
    il faut préparer une solution mère plus concentrée de l'ordre de 1000uM dont la prise d'essai est 59.74mg (pour 100ml)
    apres diluer jusqu'à 238.95ug

    pour les autres solution, on va prélever toujours de la solution à 238.95ug les volumes 0, 0.5, .... 4.5ml et ajouter les 5ml du colorant et la quantité suffisante de l'eau pour avoir un volume total de 10ml

    pour calculer leurs concentrations C2
    C2=C1V1/V2 = 2*2.5/10 =0.5uM (exemple pour la solution dont le volume de l'échantillon est 2.5ml)
    qui se ressemble s'assemble (Homère)

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