Chromatographie

[invite1f28eab7]

Bonjour,

Nous avons étudier en cours les chromatographies en phase liquide :
- chromatographie solide/liquide d'adsorption
- chromatographie ionique
- chromatographie d'exclusion
- chromatographie liquide/liquide ou de partage
- chromatographie liquide/ phase greffée

et nous avons cet exercice :

Expliquez comment séparer faire varier les temps de rétention de molécules ayant les caractéristiques suivantes :
a) Masse relative : proche de 500
pKa : proche de 10 (amine)
Solubles dans le méthanol, acétonitrile, assez solubles dans l’eau.

b) Masse relative: proche de 500 pKa : proche de 2.5

Solubles dans le méthanol, acétonitrile, assez solubles dans l’eau.

c) Masse relatives : proches de 500
Solubles dans l’acétate d’éthyle, peu solubles dans l’hexane, insolubles dans l’eau.

Justifiez le choix d’une phase stationnaire, discutez le choix de phases mobiles acceptables en théorie.

mes propositions de réponses :
Dans le cas a)
- on peut utiliser une chromatographie liquide/ phase greffée avec une phase stationnaire polaire et une phase mobile eau avec méthanol ou eau avec acétonitrile.
- si elle est soluble dans la phase mobile elle va être éluée rapidement, on peut augmenter la proportion de modificateur organique pour augmenter la lipophilie de la phase mobile (augmenter la proportion de méthanol ou acétonitrile ) et diminuer le temps de rétention
- on peut jouer sur le pH pour augmenter le temps de rétention comme c'est la forme non ionisée la forme la plus lipophile. Pour avoir que la forme non ionisé (pH= pKa +2 ) mais dans ce cas le pKa est trop grand et si on se met à pKa + 2 unité on risque de détruire le support

dans le cas b )
- chromatographie liquide/phase greffée comme pour le cas a
- on peut aussi augmenter la proportion de modificateur organique
- on peut jouer sur le pH pour avoir que la forme non ionisée ( se mettre à pH= pKa -2)

pour la c)
- utiliser une chromatographie d'adsorption avec une phase stationnaire qui a un adsorbant polaire ( silice) et une phase mobile avec hexane et des solvants polaires mais je ne vois pas comment modifier le temps de rétention

Merci d'avance pour votre aide !!
-----

[sfnsfn2]

bonsoir
vous voulez séparer les composés a, b et c dont les propriétés sont données ou pour chaque molécule vous donnez le type de chromatographie:
moi j'ai compris le premier cas: séparation
- les trois molécules ont des masses voisines, dont on ne peut pas utiliser la chromatographie d'exclusion
- les trois composés ne peuvent pas portés des charges du même signe en fonction du pH. sachant que le troisième n'est pas de pKa, donc non ionisable, le premier est basique et le deuxième acide:
pH<2.5 : a+ et b
2.5<pH< : 10 a+ et b-
pH >10 : a- et b

c'est difficile d'utiliser la chromatographie ionique
- la phase normale (adsorption) peut résoudre le problème avec une phase mobile méthanol:acétonitrile/acétate d'éthyle:chloroforme, en jouant sur la force d'élution pour modifier les temps de rétention
- la chromatographie de partage : il y a une rétention avec la phase stationnaire apolaire mais vous devez utiliser une phase mobile méthanol:acétonitrile/eau avec un pourcentage élevé en solvant organique à cause de la faible solubilité. en modifiant la composition et la nature du solvant organique utilisé, le temps de rétention varie

!!!