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Dilution de protéines



  1. #1
    Chimestria

    Red face Dilution de protéines


    ------

    Bonjour,
    Je galère en fait sur une question... bon je m'explique :
    Je prépare actuellement un TP et il s'agit de préparer des gammes étalons par dilution de solutions mère d'albumine à différentes concentrations...et pour cela on calcule le volume mère à prélever avec la fameuse technique :CmVm=CfVf et donc on fait la dilution en utilisant tel volume de la solution mère puis on rajoute le solvant qui est ici du NaCl à 0.15mol/L et donc là vient la fameuse question qui est :
    Toutes les dilutions de protéines sont faites dans NaCl à 0.15 mol/L. Pourquoi utiliser une solution de NaCl à 0.15mol/L plutôt que de l'eau ?
    Voilà tout, merci d'avance pour votre réponse et vos explications

    -----

  2. #2
    vpharmaco

    Re : Dilution de protéines

    Les protéines sont sensibles à la force ionique du solvant et à son pH. Utiliser un solvant proche des "conditions naturelles" dans lesquelles évolue la protéine évite qu'elle ne soit dénaturée ou qu'elle précipite/s'aggrege du fait d'un manque de solubilité. Assez souvent on utilise un tampon salin, tamponé vers pH 7.
    Dernière modification par vpharmaco ; 05/12/2018 à 19h45.

  3. #3
    Flyingbike

    Re : Dilution de protéines

    en pratique, je ne suis pas convaincu que l'utilisation de NaCl 150mM apporte quelque chose par rapport à l'utilisation de l'eau. En tout cas, pour un dosage avec réactif type bradford, BCA, quitte à ne pas utiliser de l'eau, autant utiliser une solution tampon comme le précise vpharmaco.
    La vie trouve toujours un chemin

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