extraction SPE capsaïcine
bonjour,
je dois effectuer une extraction sur phase solide SPE afin de quantifier par la suite la capsaïcine par HPLC.
je me demande la raison pour laquelle on utilise du méthanol suivie du méthanol avec de l'acide acétique 1% pour l'élution des composés (dernière étape de la SPE). j'imagine que cela modifie le pH et donc des interactions avec la phase stationnaire c18 (silice greffé), mais encore ?
merci
Bonjour.
Quel est ton protocole complet ?
brièvement voilà mon protocole:
1. extraction de la capsaicine d'un échantillon --> on obtient un extrait de piment complété avec de l'eau.
2. Nettoyage par SPE: la cartouche spe tc18 est conditionnée (acétonitrile, méthanol puis eau en dernier), ensuite l'extrait de piment est passé à travers la cartouche. finalement, la capsaicine est éluée par du méthanol suivi de méthanol contenant 1% d'acide acétique.
3. HPLC (phase mobile méthanol: eau (70:30)
je ne sais pas si c'est plus clair ainsi...
merci!
Es-tu sûr que tu récupères la même chose avec MeOH et MeOH/AcOH ? Si un éluent marche pourquoi en faire deux différents à la suite ?
j'ai oublié de préciser que je récupère la capsaicine et la dihydrocapsaicine... alors j'imagine que le MeOH permet de faire éluer un premier composé et l'ajout de MeOH/AcOH permet de faire sortir le deuxième composé? comment l'AcOH agit-il?
merci
D'où le protocole completQu'est-ce que tu récupères ? Dans quel ordre ?
On peut imaginer un effet du pH sur l'élution ou de la polarité. Les structures sont assez proches quand même...
