J'essaie de résoudre un exercice a priori très simple, mais là, je bloque.
Je m'explique. Il s'agit de préparer un mélange réactionnel de PCR à partir de réactifs donnés, soit:


- Matrice d'ADN génomique (100ng/uL)___Volume final:2 uL
- Tampon 5X_______________________Volum e final:5 uL
- Amorce sens (10uM) _______________Volume final: ?
Amorces anti-sens (10uM)____________Volume final: ?
dNTP (2,5mM chacun)________________Volume final:2uL
Polymérase____________________ ____Volume final:0,25 uL
MgCl2 (15 mM)_____________________Volume final:2,5 uL
eau___________________________ ___Volume final:?

TOTAL_________________________ ___Volume final:? uL

Voilà comment je vois le problème:
Le tampon de réaction étant initialement de 5X, comme on en prend 5 uL et qu'on le veut a priori 1X au final, cela suppose que le volume total est de 25 uL.

Pour les amorces (anti-sens et sens), on a les concentrations initiales, le volume final, mais pas les concentrations finales.... donc je ne peux pas appliquer la formule Ci.Vi=Cf.Vf ou autre pour trouver le volume à prélever...

Normalement c'est un jeu d'enfants ce genre d'exercice, mais là je ne sais pas.

Pourriez-vous m'aider?