Dominant Négatif

[invite67bd8009]

Quelqu'un pourrait-il m'expliquer ce qu'est la technique de dominant négatif en biologie moléculaire ???

Merci d'avance!

-----

[Yoyo]

Bonsoir,

Ce n'est pas une technique mais un type de mutant que l'on rencontre. Une mutation conferant un phenotype dominant négatif, correspond a une mutation qui provoque la perte de fonction, mais cette perte de fonction n'est pas restaurée par la présence d'un autre allèle sauvage (donc fonctionnel) d'ou le terme "dominant".
C'est assez typique des protéines multimériques ou il suffit d'avoir l'un des monomères inactif pour abolir totalement l'activité de l'enzyme.

Yoyo

[invited8287251]

Ou un récepteur qui garde sa capacité de liaison à une hormone mais qui ne peut pas transduire le signal par ex
C'est effectivementn un terme génétique, mais on peut en faire par la bio mol en isurexprimant un récepteur tronqué (par ex) ou un "morceau d'enzyme"
PS : Bounannée a tous!

[invite67bd8009]

C'est quand même pas mal utilisé en biologie cellulaire et moléculaire pour étudier le rôle d'une protéine dans une voix de transduction par exemple ; donc c'est aussi une technique, non ?!?!?!

Donc je voulais savoir comment on obtient une cellulle avec une protéine dominant négatif, en modifiant l'ADN dans le génome, ou en transfectant avec un ADN ou un ARN muté ???

[A voir en vidéo sur Futura]

[inviteb73ce398]

donc c'est aussi une technique, non ?!?!?!

Je dirai que c'est tout au mieux un outil. On devrait d'ailleurs parler de proteine a effet dominant negatif (ou actif, les deux existent) et non de dominant negatif en parlant d'une proteine mutante. Ca peut ressembler a du pinaillage, mais on peut obtenir des effets dominants negatifs juste par surexpression de proteines sauvages.

Donc je voulais savoir comment on obtient une cellulle avec une protéine dominant négatif, en modifiant l'ADN dans le génome, ou en transfectant avec un ADN ou un ARN muté ???

Par tranfection d'ADN mutee en general ou microinjection de proteine ou ARN. La modification du genome reste nettement plus delicate et quitte a inactiver la fonction d'une proteine autant enlever carrement le gene d'interet.