Clonage ADNc par RT-PCR

[boobz57]

Bonjour à tous,

Je cherche une explication sur le clonage d'un ADNc par RT-PCR. Car dans mon cours j'ai une méthode, la voici

Action de la transcriptase inverse sur les ARNm (choix des amorces) et on obtient ADNc + ARNm. Ensuite on degrade les ARNm pour obtenir des ADNc simple brin que l'on pourra transformer en double brin grace à l'action de l'ADN polymérase.

Je suis d'accord c'est simplifié mais les idées principales sont la.
Par contre cette méthode n'est pas la méthode par RT-PCR ??

Si effectivement ce n'est pas la méthode par RT-PCR quelqu'un pourrait me donner un lien ou m'expliquer qu'elle est cette méthode par RT-PCR.

Merci
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[jerome.lebloch]

Bonjour,

Si tu part d'un ADNc, tu fait tout simplement une PCR. Si tu part d'ARNm, il te faut l'étape de RT pour obtenir tes ADNc puis faire la PCR.

Si tu as besoin,
http://fr.wikipedia.org/wiki/R%C3%A9...olym%C3%A9rase