Systeme d'expression chez E. coli
Bonsoir
J'aimerai savoir quel est d'apres vous le promoteur bactérien le plus fortement réprimé/induit?
le systeme tet a trop de fuite, idem pour T7. J'ai entendu dire que le promoteur arabinose était bien.
Merci pour tous vos avis/commentaires.
Yoyo
Salut,
Il y a un systeme tet modifie qui est tres performant. C'est sorti il y a une dizaine d'annee par un labo allemand. Le systeme est en fait constitue de module, tu choisis ton MCS, ton ori et ta resistance. J'essaierais de retrouver les coordonees si tu veux. Par contre ils ont vendu le brevet et le plasmide est tres cher (~800E).Envoyé par Yoyo
Il y a aussi le pQE-80L de Qiagen. C'est un T5 lacO-lacO et lacIq est porte par le plasmide. Tu as une grosse repression (presque 0) et une grosse activation (mais moindre que des systemes sans lacIq)
L'arabinose est cool aussi, c'est les plasmides pBAD. Presque a zero sans ara, mais l'induction par contre est pas terrible (pas top pour de la purif prot).
A+
SAlut
Merci Gorben pour ces indications. J'aurai du le préciser plus tot, mais je ne souhaite pas faire de la purife, juste exprimer une protéine, et m'assurer que lorsque je réprime son expression, son taux d'expression est le moins élevé possible.
YOyo
Dans ce cas, je pense que l'arabinose est une bonne idee
Sinon y'a aussi des systemes de phage avec cI Ts mais ca t'oblige a changer la temperature (par contre la repression est top, l'induction aussi)
A+
