TBE et gel de migration

[invite59cd858d]

bonjour tous le monde
y as t'il une relation entre la concentration du gel (exp 1%) et la concentration du TBE (exp 0,5X)
merci d'avance
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[invitee7a3aaed]

Quand je faisais des gels, je me souviens qu'on ne se prenait pas la tête. On mettait 2-3 gtts.
S'il y a une relation je dirais plutôt que c'est avec le volume, non ?

[invite59cd858d]

bonjour
ben 2-3 gouttes de quoi? je pense que tu parle du BET, car je parle du tampon TBE et de la quantité d'agarose
exemple:
si je prépare 100µl d'un gel d'agarose à 1% et du TBE 1X est ce que la concentration du tampon influ sur la qualité du gel et inverssement

[inviteae6c05c4]

Tu ne coules pas ton gel dans le tampon de migration, donc non, il n'y a pas d'effet de l'un sur l'autre. Les paramètres de concentration de ton gel et ceux de ton tampon vont par contre influencer la migration tous les deux.

[A voir en vidéo sur Futura]

[Flyingbike]

euh en principe le gel est coulé dans le TBE si... Tu peux tres bien utiliser du 0,5x ou du 1x dans le gel ou dans la cuve, ca ne changera rien du moment que tu es en voltage constant...

[inviteae6c05c4]

euh en principe le gel est coulé dans le TBE si... Tu peux tres bien utiliser du 0,5x ou du 1x dans le gel ou dans la cuve, ca ne changera rien du moment que tu es en voltage constant...

Autant pour moi, j'utilise des gel pré-coulés

[Flyingbike]

rhalala on voit ceux qui ont les moyens hein

[inviteae6c05c4]

Par hasard, j'ai du couler moi-même un gel ce matin (dur dur), et je persiste, je ne le coule pas dans le tampon !

[piwi]

Vous le coulez dans quoi alors? Pas de l'eau, sinon il doit avoir un drole de tête votre gel...

[inviteae6c05c4]

Je ne le coule dans rien. Je prépare ma petite mixture qui va polymériser tranquillement entre les deux plaques de verres.

[piwi]

Là vous parlez d'un gel de polyacrylamide (pour les protéines ou les acides nucléiques en haute résolution, type séquençage) que l'on migre en tris/glycine, tris/tricine, ou MOPS.

Ce dont nous parlons ici c'est de gel d'agarose que l'on coule et migre en TBE ou TAE.

Cordialement,
piwi

[invitec9f0f895]

Je ne le coule dans rien. Je prépare ma petite mixture qui va polymériser tranquillement entre les deux plaques de verres.

Si tu coules entre deux plaques de verre c'est plus probablement des gels de polyacrylamide et pas d'agarose.
Mais meme dans ce cas la tu as un tampon, (tris la plupart du temps)

YOyo

[invite71f23525]

Je pense que Fabien veut dire qu'il verse son gel d'agarose en fusion sur une plaque de verre (un moule) qui n'est immergée dans rien du tout. Cette façon de le dire :

euh en principe le gel est coulé dans le TBE si...

laisse penser que l'on verse le gel d'agarose en fusion dans un moule qui est immergé dans le tampon TBE...Voyez-vous? Ce sont des habitudes linguistique pas forcément justes.

Greg

[Flyingbike]

peut etre, mais l'agarose ne va pas se mettre a fondre tout seul si on ne le dissout pas dans un liquide... :/