Bonjour,
Actuellement en stage je cherche à mettre en évidence un état dimérique d'une protéine en solution.
On m'a conseiller d'utiliser un agent de couplage peptidique : l'EDC (http://www.piercenet.com/Objects/Vie...ly&ID=02030312)
En présence d'EDC et après deux heures de réaction je remarque bien une deuxième bande en SDS-PAGE à un taille double de ma protéine "monomérique".
Cependant, je n'arrive pas à comprendre comment l'on peut réellement conclure à une dimérisation. Cet agent, l'EDC, ne permet-il pas le couplage peptidique ? Ne suffirait t-il pas d'un contact rapide entre deux protéines en solution pour les coupler, alors qu'elles ne se dimériserait pas ?
J'ai penser que comme l'EDC est un agent de couplage dit 'zero length" que les protéines devrait vraiment être proches pour que la réaction puisse se faire !
Pouvez-vous un peut m'éclaircir ? Merci
Bonne soirée.
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