Bonjour à tous, voilà un petit moment que je fais des mutagénèse en utilisant des kits stratagene XL site directed mutagenesis et jusqu'à présent je n'avais aucun problème.
Cependant j'essaie depuis quelque temps d'obtenir des nouveaux mutants mais je me confronte à un problème récurent:
Ma mutation est correctement introduite mais je me retrouve avec une séquence qui change à chaque fois: je passe d'une séquence TGAAAAT à une séquence CGAGAAC. Ça me fait ça avec une mutation que j'essaie d'introduire 9 nucléotides en amont ou directement dans la séquence citée.
J'ai déjà changé mes amorces et le problème se répète.
Auriez vous déjà rencontré ce problème de substitution et auriez vous des solutions pour régler ce pb?
Merci d'avance.
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