bonsoir,
est-il possible de realiser une mutation sur une seule base d'un fragment d'ADN génomique, c-à-d de cibler la mutation sur UNE seule base bien précise, si oui, comment y procédé ?
et, es ce que la précipitation par les sels a les mêmes effets que celle produite par les solvants organiques sur la quantité d'ADN ?
merci d'avance...
Une solution possible est de placer ton fragment dans un plasmide, puis de dupliquer ce plasmide avec des primers contenant la mutation voulue en plein centre. Avec un mismatch de seulement 1 sur 25-35 bases, ça doit jouer... Tu te retrouves avec tout un tas de plasmides contenant ton unique mutation pile là où tu la veux.
Ce n'est qu'une solution parmi d'autre, je suis sûr qu'il doit y avoir plus simple...
Quelques infos supplémentaires ici : http://www.ens-lyon.fr/RELIE/PCR/res...cr/mutapcr.htm
merci bcp pour vos reponse, le site est très explicite, j'aimerai avoir les autres possibilités pour faire ça, mis a part la PCR
pour l'ADN es ce que c'est vrai qu'avec la précipitation avec le sel, on aura de l'ADN plus concetré que celle en utilisant les solvants ?
Je suis d'accord avec cette méthode qui reste quand même assez simple, c'est d'ailleurs ce que j'allais suggérer !Envoyé par AstroBax
Bonne chance
Si tu as de l'argent il y a une méthode géniale: tu fais synthétiser la séquence directement, Eugogentec fait ça très bien par exemple pas pas trop cher me semble t'il! Après tout dépend de ce que tu veux faire de ta séquence ensuite.
