Bonjour a vous!
Je suis devant un problème pour mon stage de master.
Voici le cas:
J'ai réussi a séquencer une partie d'un gène a l'aide de primers dégénérés.
L'objectif de la manip est de trouver une mutation ponctuelle présente chez d'autres éspèces.
Cette mutation, qui induit une résistance, est présente a différentes positions ( par contre toujours sur le me domaine du meme gène).
Je n'ai malheureusement pas réussi a séquencer tout le domaine avec mes primers dégénérés et n'ai donc pas pu comparer tous les sites de mutations possibles.
Ma question est donc la suivante:
Connaitriez-vous une technique permettant de séquencer quelques centaines de bases en amont de ma séquence déjà connue sans utiliser des primers dégénérées? (j'ai pensé a de la marche sur l'ADN (type seegene DNA walking kit) mais ca ne rentre pas dans mon budget!)
Toute aide est la bienvenue!
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