KO d'un gène de levure
Bonsoir,
Dans mon exercice, on a préparé un allèle interrompu d'un gène de levure (ORF574) avec un allèle sauvage du gène L [leu+] et on a linéarisé cette construction. Ensuite on utilise cette construction pour transformer une souche de levure diploïde homozygote pour une délétion complète du gène L et une mutation dans un gène T qui confère une auxotrophie pour la tyrosine. On me demande:
1) Comment un fragment linéaire peut-il être transmis aux descendantes de chaque cellules transformées ?
2) De faire le schéma de l'évènement rare qui est indispensable
3) Cet évènement ayant une faible probabilité, le diploïde obtenu est-il homo ou hétérozygote pour cette construction (donner son génotype entier et son phénotype probable).
4) Pourquoi la transformation a-t-elle été faite sur un diploïde et non sur un haploïde ?
Selon moi:
1) Il faut faire une recombinaison hétérologue (évènement rare)
2) Je ne sais pas comment faire (j'ai essayé selon ce modèle
mais je me suis embrouillée...)
3 et 4) Je n'en sais rien (puisque le 2) est floue pour moi...)
Voilà, si vous pouviez m'aider ça serait sympa!
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