Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 3 sur 3

Race Pcr



  1. #1
    mimosa

    Thumbs down Race Pcr


    ------

    Je craque ça fait presque trois mois que j'essaie de cloner l'extrémité 5' d'une enzyme par race pcr (environ 150 pb) et une fois que je reçois la séquence de mon clone je retrouve la séquence de l'anchor primer accolée à celle de mon amorce spécifique.
    Qui peut m'aider quelqu'un a déjà rencontré ce problème ou a une autre solution pour cloner l'ext 5'?
    PS: j'utilise le kit 5'/3' RACE de Roche.

    Merci d'avance

    -----

  2. #2
    flashman

    Re : Race Pcr

    Il peut y avoir beaucoup de cause à ton problème, c'est l'inconvénient de la PCR. Il est donc difficile de t'apporter une aide. Si j'ai bien compris tu amplifie tes amorces au lieu d'amplifize ta séquence c'est bien ça?

  3. #3
    Noun

    Re : Race Pcr

    \Salut,
    A mon avis, il faut tester plusieurs amorces specifiques differentes et bien d'utiliser une amorce decalee pour la deuxieme PCR (plusieurs differentes). A part ca, ton probleme peut peut etre etre resolu par une bonne purification apres le traitement a la terminal deocynucleotidyl transferase.
    Tu peux aussi bien sur augmenter la temperatue d'appariement.
    Sinon, pose ta question sur le web de Roche, ils repondent vite
    Noun
    Dernière modification par Noun ; 08/12/2005 à 18h57.

Discussions similaires

  1. Race PCR
    Par Sam25 dans le forum Biologie
    Réponses: 8
    Dernier message: 17/11/2008, 16h41
  2. [Biologie Moléculaire] PCR en temps réel ou Q-PCR
    Par belouga7 dans le forum Biologie
    Réponses: 4
    Dernier message: 22/10/2008, 19h09
  3. Technique de RACE-PCR?
    Par aaricia8 dans le forum Biologie
    Réponses: 7
    Dernier message: 24/05/2008, 14h17
  4. Notion de race et d'espèce
    Par Nergal dans le forum Biologie
    Réponses: 27
    Dernier message: 01/04/2007, 20h16
  5. Différence entre race et espèce
    Par nihil dans le forum Biologie
    Réponses: 8
    Dernier message: 27/06/2006, 22h55
Découvrez nos comparatifs produits sur le sport et la santé : thermomètre médical, soins personnels...