je fais un dosage enzymatique (adh) de l'éthanol sanguin, j'utilise un tampon : pyrophosphate de sodium et semicarbazide titré à pH9.
je veux savoir pourquoi un pH9? j'ai pensé que puisque le semicarbazide est une amine, un tel pH favorise plus sa condensation avec l'acetaldehyde (formé à partir de l'éthanol et le NAD) pour former le semicarbazone. Est ce quelqu'un peut me confirmer ou me corriger? merci d'avance
Salut,
Pour doser l'éthanol de façon précise, tu dois être sûr que la réaction qui va avoir lieu va bien être dirigée vers la formation de NADH (puisqu'en fait c'est lui que tu dose). Comme expliqué ici, tu as trois moyens de favoriser cette réaction (ajout de semicarbazide, excès de NAD+ et/ou pH basique). Ton pH est donc élevé pour éviter d'être dans des conditions acides qui entraîneraient plutôt la formation de NAD+.
Dernière modification par Zellus ; 16/09/2012 à 05h36.
je vous remercie beaucoup.
