Bonjour à tous, soit une cellule hote transformée. Tant qu'elle n'a pas reçu de vecteur d'expression elle ne pourra pas commencer la transcription du gène d'interet ?
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15/03/2013, 16h33
#2
TanguyE
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Re : vecteur d'expression
Bonjour,
Par définition, une cellule transformée à déjà reçu du matériel génétique par transformation, en général un vecteur d'expression.
Donc pour répondre à votre question, tant qu'elle n'est pas transformée, elle ne contient pas le vecteur du gène d'intérêt et il n'y a donc pas de transcription.
15/03/2013, 16h55
#3
invitea41b37f0
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Re : vecteur d'expression
Je ne suis pas sur de comprendre. Le vecteur d'expression est le gène qui code pour la protéine recombinante ou bien c'est un fragment d'ADN qu'on ajoute en plus pour amorcer la transcription ?
15/03/2013, 16h57
#4
invite7c3cbbcf
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Re : vecteur d'expression
Il existe des cellules qui ont été modifié pour les rendre "permissive" pour SV40(ex: HEK293T)... mais si tu veux exprimer ton gène il faut les transfecter avec un vecteur contenant un promoteur SV40.
Pour les définitions, la transfection c'est le transfert de gène dans une cellule eucaryote, on parle de transformation pour les bactérie. La transformation dans une cellule eukaryote ça fait plutôt penser au processus cancéreux...
En espérant aider.
Aujourd'hui
A voir en vidéo sur Futura
15/03/2013, 16h59
#5
invite7c3cbbcf
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Re : vecteur d'expression
Le vecteur d'expression comprend la partie codant de ton gène, ainsi que des séquence non codante: promoteur, origine de réplication, polylinker... et souvent des gènes de résistances (ampiciline, neomycine...) ou des "tag".
15/03/2013, 17h00
#6
TanguyE
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Re : vecteur d'expression
Le vecteur d'expression est en général un plasmide circulaire contenant le gène d'intérêt accompagné de tous les éléments nécessaires à sa transcription, une ou plusieurs origines de réplication et un marqueur de sélection (gène de résistance ou autre).