bonjour,
je compte conserver mes souches sous forme de cryotubes à _ 20, pourriez vous m'aidez pour le protocole car ce q j'ai pour le moment ne marche pas (contamination), il s'agit de souche d'actinomycetes avec spore donc en fait je vais conserver des spores, aussi le comptage se fera sur cellule de Mallasèze, aidez moi aussi pour la méthode de comptage sur cellule de mallasèz. merci pour votre aide
Essaie de te renseigner en faisant des glycerol stock.
Bonjour, effectivement pour congeler des souches bactérienne la méthode la plus utilisée est le stock glycérol :
850 µl de ta culture bactérienne + 150µl de glycérol stérilisé !! En travaillant autour d'une flamme !!
Généralement on conserve les stocks glycerols à -80°C (conservent plus longtemps)
Pour la cellule de malassez voici un lien qui pourra t'aider :
Cellule de Malassez
Bonjour,
qu'est-ce qui ne fonctionne pas exactement dans ton protocole? La récupération des souches? La congélation? La pureté?
1) pour la conservation en cryotubes, tu as différents protocoles selon les labos mais grosso modo:
- culture en bouillon (durée dépend de l'espèce)
- centrifugation pour concentrer la culture
- répartition dans des cryotubes contenant une solution TS ou BTSC avec 20% (V/V) glycérol ou avec Lait glycériné
Tu as également le gélose-stock où tu congèles une carotte d'une culture sur boîte mais je ne sais pas si c'est une technique de conservation à -20°C.
Normalement, pour un protocole plus précis, tu devrais trouver ton bonheur sur Google Scholar, ex: http://www.scd.uhp-nancy.fr/docnum/S...8_MAVINGUI.pdf
2) Pour la méthode de comptage en cellule de Malassez: que veux-tu savoir au juste? Comment préparer ta cellule ou comment la lire? Un excellent lien: http://romain.ferry.pagesperso-orang...h/malassez.htm
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