Ligation/plasmide

[invite08f5a405]

Bonsoir,
Je voudrai savoir le taux de réussite d'une ligation plasmide/insert.
La probabilité d'entrée du plasmide dans une cellule après "ouverture" des pores au CaCl2.
J'ai beau fouillé le net je ne trouve pas mes réponses....
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[invite08f5a405]

Alors le rendement de transfection est de 5% dans le cas d'une précipitation au CaCl2.

[TanguyE]

Bonjour,

Pour la ligation, dans les conditions optimales: proche de 100%. A noter que les conditions optimales ne sont pas nécessairement celles inscrites sur le protocole du fournisseur de la ligase.

Pour la transfection Calcium-phosphate, c'est un peu plus variable: très efficaces dans des lignées mammifères types HEK293 (jusqu'à 95%), moins efficaces pour d'autres. Pareil, ce mode de transfection doit être optimisé pour bien fonctionner.

[invite08f5a405]

Merci beaucoup !

[A voir en vidéo sur Futura]