Calcule vitesse initial d'endocytose chez l'amibe

[katsiah]

Bonjour !

En TP de biologie cellulaire on cherche a effectuer une mesure de l'activité endocytaire chez l'amibe ( dictyostelium discoideum)
dans un premier temps vous avons fait une cinétique d'endocytose d'HRP ( avec une concentration de 20microg /ml)
Après calcule de la densité cellulaire on a tracé une courbe DO en fonction du temps ( de 0 à 60 min)
puis nous devions calculer la vitesse initiale d'endocytose a partir du graphe puis détailler les calcules

je sais que la Vi = la pente / ε * l

le problème est comment déterminer la valeur d'epsilon ?

Merci d'avance
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[Flyingbike]

epsilon est le coefficient d'absorption molaire. Il est propre à votre molécule d'intérêt et est en général donné.

[katsiah]

Merci pour votre réponse

oui il doit étre propre à l'HRP sauf que le prof nous l'a pas donné =/ et c'est ça qui nous a embrouillé et en cherchant sur internet je trouve des valeures différantes .

[camulus]

S'agit il de l'HRP en elle même ou d'un substrat (ou produit) chromogène ? Si dans les manips précedentes vous avez quantifier l'endo/exocytose par spectrophotométrie et que vous avez déterminé la concentration de produit chromogène, ton coefficient d'extinction doit être quelque part dans le sujet. Cependant si quelque part tu peux trouver une courbe (ou quelques points) qui te donne l'absorbance en fonction de la concentration, tu peux retrouver ce coefficient en utilisant la loi de beer lambert. Il est difficile de trouver un coeff sur internet car il change en fonction des conditions expérimentales (v'est peut être la raison pour laquelle tu trouve des valeurs différentes). Vous avez donc déterminé (ou on vous l'as donné) à un moment ou un autre.

Camu

[A voir en vidéo sur Futura]

[katsiah]

finalement j'ai trouvé la réponse j vais la poster pour que les autres en profitent
vu que le prof ne nous a pas donné de coefission d'hrp ça veut dire on en a pas besoin pour calculer la vitesse du coup on effectue juste un calcul basique de pente

Vi = delta (abs) ou (DO) / delta temps

voilà et merci encore pour vos réponses =)