Détection de protéines mal repliées par western blot?

[hoshi]

Bonsoir,

Je voulais savoir si il était possible de démontrer la présence de protéines mal repliées par western blot.
En résumé, on doit prouver que le virus CVB5 induit un stress du RE dans des cellules B pancréatiques.
Notre idée de départ était de prendre comme contrôle positif de l'insuline normal et de le comparer à l'insuline issue des cellules infectées.

Est-ce que c'est possible de faire les choses comme ca? Si oui, qu'est ce qu'on verra comme différence dans le western blot?

Merci beaucoup
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[biseibutsu]

Bonjour,

Si ce n'est que pour une protéine, cela doit être possible de voir un changement de taille de la protéine en condition non dénaturante. Une protéine mal replié étant généralement plus grande que celle bien replié, elle migrera moins vite. Mais l'insuline est vraiment petit en taille, et je ne sais pas s'il est possible de voir clairement un tel changement de conformation.

Si votre objectif est ensuite de regarder toute les protéines (donc le protéome), le DIGE-2D (2 dimensional difference gel electrophoresis) est probablement la technique la plus adapté (toujours en condition non dénaturante).