séquençage de l'ADN

[dadi1999]

BONJOUR!

J'aimerais savoir comment faire pour connaitre la séquence de l'amorce pour le séquençage d'un gène en utilisant la méthode de sanger .

et MERCI !!
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[jkitt]

Bonjour,

La question n'est pas très claire ...

1°) Un séquençage par la méthode de Sanger nécessite deux amorces (comme pour une PCR)
2°) Si on sait quel gène on veut séquencer, on va par exemple rechercher dans des bases de données (NCBI notamment) les séquences en amont et en aval de ce gène
3°) On va ensuite concevoir un ou plusieurs couples d'amorces à tester en PCR (différentes paramètres à optimiser comme la température d'hybridation, la concentration en sels, ...)
4°) Après vérification (gel d'agarose par exemple) et purification, on pourra séquencer les produits d'amplification

[Flyingbike]

Hello

Un Sanger ne nécessite pas 2 amorces
On peut séquencer dans un sens

[jkitt]

Hello

En effet, désolé pour cette méprise ! Mon dernier Sanger remonte à loin

[A voir en vidéo sur Futura]