Convertir une vitesse en ΔA/min en UI

[invite9620509a]

Bonsoir , voici l'énoncé de mon exercice :

L'hydrolyse de lortho-nitrophenol-galactoside par la betagalactosidase entraine la libération d'ortho-nitrophénol dont l'apparition est suivie à 373nm, point isobestique des formes protonées et déprotonées de l'ortho-nitrophénol.

On mesure , à différentes concentration de substrat , les Vitesses initiales , exprimées en variation d'absorbance par minute.
ε(subtrat) = 350M^-1/cm
ε(produit) = 2400M^-1/cm

Substrat (mM)             Vitesse (ΔA/min)
     0.138                           0.148
     0.220                           0.171
     0.291                           0.234
     0.560                           0.324
     0.766                           0.390
     1.46                            0.493

Determiner graphiquement les paramètres Vm(en M/min) et Km


Je pense devoir dabord commencer par convertir ΔA/min en UI c'est a dire en μmol/min. Meme en faisant des recherche sur le net je n'ai aps toruvé d'explications claires ... Quelqu'un peut m'aider ?

Pour la suite , je sais comment ,definir Vm et Km ( jutilise la représentation en double inverse). Mais ce qui me bloque c'est le fait que les deux coefficient d'extinction molaire soient donnés ... Quelqu'un peut me guider dans cet exos ? merci d'avance.
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[Flyingbike]

Commencez par utiliser la loi de Beer-Lambert qui permet de corréler l'absorbance à la concentraton

Pas besoin de s'embêter avec l'unité de temps pour l'instant.
Vous avez ε, vous avez ∆A, vous pouvez trouver la concentration

[invite9620509a]

Merci pour ton aide , mais ducoup je dois utiliser l'epsilon du substrat ou du produit ? moi j'aurais dit epsilon du substrat ....

[Flyingbike]

Non
Dans l’énoncé on vous dit qu’on suit l’apparition de l’ortho nitrophenol
C’est donc l’epsilon du produit
Mais ça n’est pas très clair

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite9620509a]

Donc j'obtient :

si je prend la première valeur : 0.148 ΔA/min et que je veux la convertir en UI (μmol/min) , je la divise par epsilon produit qui vaut 2400 , 0.148/2400=6.17*10^-5 mol/L.
Il ne me reste plus qu'a multiplier cette valeur par 10^6 pour l'avoir en UI , on obtient 0.148 ΔA/min = 61.67 .

Donc :
Substrat (mM) Vitesse (ΔA/min) Vitesse (U.I)
0.138 0.148 61.67
0.220 0.171 71.25
0.291 0.234 97.5
0.560 0.324 135
0.766 0.390 162.5
1.46 0.493 205.42

Ensuite si tout ca est bon je trace le graph en representation inverse , je trouve y= (180.67*10^-5)x + 410.03*10^-5
et si j'ai bien compris -1/km = x dans l'équation f(x) = 0 donc Km = 6.74 mM et 1/Vm = 410.03*10^-5 => Vm = 243.88UI et pour l'avoir en M.min-1 comme demandé on multiplie par 10^-6 = 2.44*10^-4M.min.

Ai je fait des fautes ou tout est bon svp ?