Bonjour, voici l'énoncé :
Afin de calculer l’activité enzymatique de l’EB, l’étudiant a réalisé le test décrit ci-dessous. A 700 microL d’oNPG (orthonitrophényl-Beta-D-galactopyranoside) à 1,881 mg.mL-1 sont ajoutés 100 microL de tampon TS pH 7,5 et 200 microL d’EB préalablement dilué au 1/200e dans le même tampon. Après une incubation de 12min à 30°C, la réaction est arrêtée par ajout de 1 mL de Na2CO3 1M et l’absorbance est lue à 420 nm contre un témoin sans enzyme. Le test est réalisé en triplicat et la moyenne des absorbances mesurées est 0,42. Epsilon produit de réaction = 4750 M-1.cm-1.
Calculer l’activité enzymatique de 1 mL d’EB non dilué. Détaillez tous les calculs.
Voici ce que j'ai fait :
Delta t = 12 * 60 = 720 sec
Delta c = A/(epsilon * l) = 0.42 / 4750 = 8.84*10^-5 M
V0= Delta c / Delta t = 8.84*10^-5 / 720 = 1.2*10-7 M.s-1
Vréactionnel = 700 + 100 + 200 = 1mL
AE(1mL) = V0 * Vréactionnel * Facteur dilution = 1.2*10-7 * 10^-3 (pour le mettre en litre) * 200 = 2.4*10^-8 kat = 24 nkat
Est ce vous pourriez vérifier mes calculs ? Est ce que j'ai fait une erreur quelque part ?
Merci par avance
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