Bonjour à tous!
À partir d'une protéine de fusion couplée à la GFP, lors de l'immunofluorescence, si on n'utilise pas d'anticorps anti-GFP, alors on ne voit pas apparaître de fluorescence alors que la GFP est une protéine fluorescente. Cela pourrait-il être dû au temps de maturation de la GFP (relativement long)? Ou au fait que la protéine clive la séquence de la GFP en absence d'anticorps (Pour quelle raison? Je ne sais pas trop...)
Merci d'avance pour vos réponses!
Noory
ça peut être du à la protéine à laquelle elle est fusionnée, à une éventuelle dégradation, et surtout au traitement (fixation etc,) avant l'IF
La vie trouve toujours un chemin
Tout d'abord merci pour votre réponse,
Concernant le rôle joué par le traitement avant l'IF, cela veut dire que ce dernier détruirait la fluorescence spontanée de la protéine?
oui, de nombreux composés peuvent "quencher" le signal, mais la fixation et.ou la dénaturation des protéines peuvent irrémédiablement détruire le fluorophore
La vie trouve toujours un chemin
