Décongélation cryotubes

[Romssss]

Bonjour, je me demandais, lorsqu’on sort les cryotubes de l’azote, (en vue de faire de la culture cellulaire) on les met au bain marie avant de les utiliser , pourquoi ?
Merci
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[Flyingbike]

Pour les décongeler

[Romssss]

Merci, mais je pensais que cela avait un rapport avec le DMSO, le fait de les chauffer faisait ressortir le DMSO...

[Flyingbike]

Pas à ma connaissance. Dans tous les cas, il faut limiter le temps de décongélation pour minimiser le contact cellules-DMSO (ainsi que les débris cellulaires)

Il ne faut donc pas trainer et diluer tout ça.

[A voir en vidéo sur Futura]

[FinalSpark]

Correct, pas trainer et diluer...

Certains protocoles recommandent de ne pas bouger le tube dans le bain marie, d'autres le contraire.... (toujours ce DMSO).
Le truc que j'utilise c'est dés que l'on voit un glacon flotter dans le tube, hop direct vers la hotte, ensuite protocole standard: transfert Falcon 15, on ajoute goutte á goutte 9mL de DMEM pour diluer le DMSO, 5 min a 300g, et on peut enfin enlever le milieu et travailler sainement pour le comptage après suspension...