Pour résumer en gros, on incube l'enzyme avec de l'ADN plasmidique (circulaire ou linéarisé) et on veut voir si, avec différents cofacteurs, elle arrive à cliver l'ADN ou non. Je vous ajoute un petit schéma des résultats que j'attendais: trois bandes pour le clivage d'ADN linéarisé et deux pour le clivage du plasmide circulaire (j'ai fait un petit schéma de ce que ferait l'enzyme dans les deux cas, à droite de la photo).
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Or, dans les résultats, on remarque que lorsque l'enzyme est active sur l'ADN circulaire (cf. colonne entourée en rouge), le fragment d'ADN censé être clivé est plus long (6 kpb) que les fragments non-clivés (3.5 kpb environ)... ce qui me surprend étant donné que je m'attendais plutôt à voir deux fragments plus courts et non un seul plus long que l'ADN d'intérêt entier...
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Si vous comprenez donc pourquoi ou avez des pistes, je suis preneur
Merci d'avance et bonnes fêtes
N.B. si vous voulez des infos supplémentaires, la figure (1.A/B) est issue d'un article concernant la programmation du système CRIPSR/Cas9, écrit par Doudna et Charpentier (A Programmable Dual-RNA–Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity), et que vous pouvez retrouver à la page suivante: https://www.science.org/doi/10.1126/...29?cookieSet=1
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