Cinétique enzymatique: vitesse initale

[maika04]

Bonjour,
j'ai réalisé un TP portant sur la cinétique enzymatique: nous avons crée des gammes de solutions avec une concentration en enzyme et tampon fixe et une concentration en substrat qui change.
Avec le spectrophotomètre nous avons mesuré l'absorbance de chaque solution sur 2 minutes puis le logiciel nous a permis de calculer la pente donc l'activité enzymatique (dA/dt) en abs.s-1, comment à partir de cela déterminer la vitesse initiale de chaque solution ? sachant que je suppose qu'il faille qu'elle soit en mol.s-1 et non en abs.s-1

je vous remercie d'avance
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[moco]

Pour passer de l'un à l'autre il te faut connaître le coefficient d'absorption molaire de ta substance absorbante, qu'on appelle en général epsilon.

[maika04]

bonjour,
merci pour votre réponse, en effet on me donne epsilon de l'ONP = 2500 M-1.cm-1
mais vu l'unité je vois pas comment passer d'absorbance.s-1 en mol.s-1...

[jeanne08]

La relation donnant l'absorbance A d'une solution contenant une substance à la concentration c mol/L est A = epsilon *l*c avec l épaisseur de la cuve traversée ici en cm.

[A voir en vidéo sur Futura]

[maika04]

oui je sais j'ai essayé de faire quelque chose avec cette formule mais je vois pas comment faire...
une fois que je trouve A je fais quoi avec ?

par exemple dans ma 1ere cuve avec une concentration en ONPG de 0.4mM je trouve donc A= 2500*1*0.4.10-3=1 et je fais quoi ensuite ?

[jeanne08]

Je ne sais pas comment ton TP est mené mais je pense que tu dois utiliser cette formule pour calculer la concentration à partir de l'absorbance mesurée. Tu as par exemple la relation dC/dT = (1/epsilon l ) * (dA/dt) en mol/L/s ...

[maika04]

ah je viens de comprendre ! je n'avais pas pensé à remplacer dans la formule A par dA/dt comme ça on obtient dC/dt en mol/L/s et en multipliant par le volume réactionnel de la cuve on a des mol/s !!!
merci beaucoup jeanne08 pour votre aide

bonne journée !