Bonsoir,
J'ai un petit problème sur une question concernant le dosage des amines.
le but est de calculer le nombre d'amine libre d'une molecule. On sait que cette molecule a une masse molecude 66KDa et le coef d'extinction molaire de l'amine est de 1000M/cm
J'ai bien sur fait mes étalons.
Je sais que le nombre d'Avogadro va sans doute rentrer en jeu.
On va devoir utilisé la formule de Beer Lambert .
Mais je n'arrive pas a voir comment utiliser tout cela ....
Ce n'est pas clair. Qu'est-ce que tu appelles "nombre d'amine libre" ? Est-ce le nombre de groupe amino- dans une molécule de peptide ?
Pourquoi "libre" ?
Qu'est-ce que tu appelles "coefficient d'extinction de l'amine" ?
Qu'est-ce que c'est que ces étalons ?
Ceci dit, j'imagine que tu vas déterminer par la loi de Beer la concentration d'une solution d'amine. Et j'imagine que tu connais la concentration en grammes par litre, donc en mole par litre ( avec M = 66000). la division de ces deux concentration l'une par l'autre te donnera le nombre de groupes amino- dans ton polypeptide.
Je cherche le nombre de fonctions amine libre donc NH2 qui ne sont pas inclus dans la liaison peptidique il s'agit uniquement des groupements amines des chaines latérales des acides aminés de ma protéine.
le coef d'extinction molaire de l'amine, j'ai oublié un mot, désolé
Les étalons ne servent a rien pour cet exercice effectivement
Et au final je pense avoir trouvé
Ma concentration de proteine est de 10mg/ml
Donc en groupant tout je doit avoir
Nbre d'amine=MMoleculaire/(epsilon*concentration moleculaire*longueur cuve)
Merci de votre aide !
Bonjour,
avec quel réactif révèles-tu les amines libres ?
