Transfection

[invitef31ac833]

Bonjour à tous,
J'aimerai connaître les aventages et incovénients de la transfection avec un plasmide linéarisé ou circulaire ?
merci pour la réponse
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[invite160a5434]

Bonjour.

J'avoue que ta question est assez surprenante, surtout en master ...
La transfection, dans le cadre d'un clonage, est le fait d'introduire ( je vais faire simple et généralisé ) dans une bactérie compétente, un vecteur ayant inseré un fragment d'ADN d'interet.

A partir de la, je te renvoie au principe de l'insertion, et de la ligation ... sachant que pour facilité l'insertion d'un fragment d'ADN dans un vecteur plasmidique, on dephosphoryle le plasmide après linéarisation, pour éviter que ce dernier ne se recircularise sur lui même. Pour lier le plasmide au fragment d'ADN, on fait agir la ligase.

Ainsi, pour répondre à ta question, l'insertion avec un plasmide linéaire, hors cadre d'un clonage, n'a pas beaucoup d'interet. Il n'y a pas d'avantage ou d'inconvénient, si ce n'est peut etre que sous forme linéaire, le plasmide peut etre soumis aux exonucléases ...